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Introdução O objectivo deste trabalho foi observar, identificar e estudar algumas características da molécula de ADN responsável pela transmissão hereditária das características dos seres vivos. O ADN é o suporte físico da informação necessária para o desenvolvimento de um ser vivo ( informação genética ). O ácido desoxirribonucleico (ADN) e o ácido ribonucleico (RNA) são considerados ácidos nucleicos. A unidade básica do ADN tem o nome de nucleótido e tem por constituintes uma base azotada, uma pentose e um ácido fosfórico. As várias bases azotadas têm o nome de Guanina, Adenina, Uracilo, Citosina e Timina. O ADN contém todas menos o Uracilo, enquanto que o RNA só não contém a Timina. Os dois primeiros tipos possuem um anel duplo (púricas) e as restantes um anel simples (pirimídicas). O nome da pentose do ADN é de desoxirribose, enquanto que a do RNA chama-se ribose. E, ao contrário do ADN, em que existe uma cadeia dupla, no caso do ARN existe uma cadeia simples. A estrutura do ADN é em hélice dupla e cada uma das cadeias é anti-paralela em relação à outra. As ligações entre os nucleótidos da mesma cadeia, através de um grupo fosfato têm o nome de ligações fosfodiéster. Cada pentose possui 5 carbonos e todos têm uma numeração específica. O primeiro está ligado a uma base azotada, o terceiro está ligado a outro nucleótido através do grupo fosfato desse outro e o quinto carbono está ligado ao seu grupo fosfato. A multiplicação do ADN é feita através de um processo realizado principalmente por enzimas que quebram as ligações entre as duas cadeias, originando o RNA. A replicação do ADN cumpre a hipótese semi-conservativa, ou seja cada uma das cadeias serve de molde para as novas cadeias. Assim, as novas moléculas de ADN é formada por uma cadeia nova e outra cadeia antiga. Relativamente ao modo como se multiplica o ADN existem três hipóteses: - A hipótese conservativa em que a molécula progenitora do ADN se mantém íntegra, servindo apenas de molde para a formação da molécula-filha, a qual seria formada por duas novas cadeias de nucleótidos. - A hipótese dispersiva admite que cada molécula-filha é formada por porções da molécula inicial e por regiões sintetizadas de novo, a partir de nucleótidos presentes na célula. - A hipótese semi-conservativa (hipótese mais aceite) defende a ideia de que cada cadeia da molécula-mãe forma uma nova molécula de ADN com uma cadeia totalmente nova, logo permite esclarecer o método através do qual se conserva a informação genética na replicação do ADN. No esquema seguinte pode-se observar as principais diferenças entre ADN e RNA.
Procedimento Experimental Material: - 1 banana e 1 pêssego; - Bisturi; - Almofariz; - Proveta de 50 ml; - Gaze; - Água destilada ou água da torneira; - Copo de precipitação; - Copo de plástico; - Detergente da loiça; - Cloreto de Sódio; - Etanol frio (Álcool etílico conservado no frio);
Procedimento: Actividade 1: Extracção de ADN da banana e do pêssego. 1. Descascou-se a banana, cortou-se em pequenos fragmentos e esmagou-se num almofariz. 2. Adicionou-se 50 ml de água, 2 a 3 ml de detergente da loiça e 3g de NaCl (1 colher de chá). 3. Mexeu-se tudo e aguardou-se 1 minuto. 4. Filtrou-se através da gaze a mistura. 5. Colocou-se 20 ml da mistura numa proveta. 6. Adicionou-se, lentamente e cuidadosamente, 30 ml de álcool etílico frio. 7. Deixou-se repousar até se observar a ascensão de uma camada gelatinosa. 8. Repetiu-se a experiência com o pêssego. Actividade 2: Extracção de ADN de células do epitélio bucal 1. Preparou-se uma solução salina muito concentrada no copo de plástico. 2. Colocou-se uma porção da solução salina na boca e bochechou-se vigorosamente durante alguns minutos. 3. Colocou-se o obtido em 2 novamente no copo. 4. Adicionou-se 1 a 2 gotas de detergente da loiça. 5. Colocou-se 20 ml do obtido numa proveta. 6. Adicionou-se lentamente e cuidadosamente 30 ml de etanol frio. 7. Deixou-se repousar até se observar a ascensão de uma camada gelatinosa. Apresentação dos Resultados
Discussão e Conclusão A realização da actividade experimental permitiu ao grupo observar o ADN do epitélio bucal bem como o ADN da banana e do pêssego. Para fazer as observações utilizou-se sal, que dissolve as proteínas impedindo que se misturem com o ADN e serve como meio para neutralizar a solução. O detergente, que destrói as bicamadas fosfolipídicas e outras membranas (como a membrana nuclear), o que permite a libertação do ADN. Também se utilizou álcool etílico, uma vez que o ADN não se dissolve no álcool e possibilita assim, a sua ascensão. Para além do álcool, detergente e do sal, o esmagamento dos frutos teve um papel importante na actividade, pois expõe um maior número de células aos outros reagentes. Durante a actividade experimental o grupo mostrou ter maiores dificuldades no esmagamento da fruta. Apenas para dois elementos do grupo foi mais simples realizar a actividade uma vez que, no ano lectivo anterior, já a tinham realizado na semana das ciências. A realização do relatório não revelou grandes problemas, tendo sido a introdução a parte que deu mais trabalho ao grupo e mostrou ser mais difícil de realizar. Bibliografia www.google.pt – motor de busca www.wikipédia.org Martins, Pedro e Matias, Osório; Biologia 10\11; página 30 a 35; Areal Editores, 2007. Martins, Pedro e Matias, Osório; Biologia 11; página 2 a 30; Areal Editores, 2009.
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